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讲解薄层色谱扫描仪的正确使用方法
发布时间2018-09-03        浏览次数:2051        
    薄层色谱扫描仪用于薄层色谱板或电泳板的光密度扫描。薄层定量工作zui初是通过目视法或测面积法,对薄层上分离的斑点与标准品行含量估计,但由于方法粗糙,可引起很大误差。后来将斑点定量收集后,结合比色法或紫外分光光度法等行定量,虽然准确度有所提,但操作复杂,工作效率低。因此多年来薄层色谱法只能停留在分离鉴定和半定量的水平。70 年代后各学者结合薄层色谱法的点相继设计出各种型号的薄层色谱仪,使薄层定量工作入了仪器化、自动化的阶段,从而使薄层色谱法成为微量、快速定量分析的有力手段。以下内容讲解薄层色谱扫描仪的正确使用方法。
    、薄层板制备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器行涂布 (厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度 (可通过透射光和反射光检视)。
    二、点样除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,般为圆点,点样基线距底边2.0cm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
    三、展开展开缸如需预用展开剂饱和,可在缸中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与缸样、宽的滤纸条,端浸入展开剂中,密封缸的盖,使系统 平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封缸 盖,待展开至规定距离(般为10~15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。
    四、如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。

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